Thử Thách Nghiệt Ngã 2 xoay quanh cuộc sống đầy biến động của các nhân vật chính. Hứa Văn Bưu bị giết hại ở Đài Loan, và Dĩnh Hân trở thành nghi phạm hàng đầu. Trong khi đó, Vinh Thiêm phát hiện ra người mình yêu nhất là Hy Hiền, nhưng đáng tiếc cô đã không còn tình cảm với anh.
Cuộc sống của các nhân vật càng thêm phức tạp khi một người giống Dĩnh Hân như đúc – Mỹ Na xuất hiện. Cô gây chú ý và làm dấy lên nhiều thắc mắc. Về phía Trương Tự Lực, sau thời gian xa cách, cậu cuối cùng cũng gặp lại cha ruột.
Trương Tự Lực dự định sẽ bên cạnh Điền Ninh lâu dài, tuy nhiên mọi thứ không như ý muốn. Sau khi Điền Ninh mất trí nhớ, cô quyết định kết hôn với Chí Cường. Những biến cố liên tiếp xảy ra, đẩy các nhân vật vào những tình huống éo le và buộc họ phải đối mặt với thực tại.